紫外分光光度法测定苯甲酸钠的含量（标准曲线法）
主讲人：张慧老师
一、目的
1．掌握紫外分光光度计定量操作方法。
2．掌握标准曲线法定量计算方法。
二、提要
标准曲线法定量分析苯甲酸钠，即用已知量的标准物质，配制一系列浓度的标准溶液，在相同的条件下进行测定，以仪器的响应值（UV-Vis法中为吸光度A）为纵坐标，标准溶液的浓度（C）为横坐标绘制标准曲线。利用此曲线或它的回归方程苯甲酸钠，可以计算样品溶液中该组分的含量。
式中a与b分别为标准曲线的截距与斜率。
苯甲酸钠的紫外吸收光谱在229nm处有最大吸收。制备系列浓度的苯甲酸钠标准溶液，以229nm为检测波长，测定其吸光度，计算回归方程；可测定苯甲酸钠样品溶液中苯甲酸钠的含量。
苯甲酸钠吸收光谱
三、仪器与试剂
紫外分光光度计；
苯甲酸钠/0.04MHCl储备液（100μg/ml）；0.04mol/L HCl水溶液；样品溶液
三、方法
1 检测波长的选择 以0.04mol/L HCl溶液为参比溶液，于紫外－可见分光光度计上测定苯甲酸钠标准溶液的吸收光谱（200~320nm），确定苯甲酸钠含量测定的测定波长（λ229nm）。
2苯甲酸钠标准曲线的绘制 配制浓度为2、4、6、8、10 μg/ml苯甲酸钠/0.04MHCl溶液。以0.04mol/LHCl溶液为参比溶液，测定系列浓度的苯甲酸钠/0.04M HCl溶液在229nm处的吸光度，计算其回归方程。
3 测定 以0.04mol/L HCl溶液为参比溶液，测定样品溶液的吸光度值( n=3 )，根据回归方程计算样品溶液中苯甲酸钠的含量（C，RSD%）。
教学视频：张慧老师
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